I 型糖尿病(T1DM)是自身免疫性疾病，因胰岛 β 细胞被破坏致胰岛素缺乏，全球发病率上升，尤其在儿童青少年中显著。其发病机制受遗传与环境因素共同影响，但对免疫发病关键机制认知不足，制约防治策略开发。目前临床依赖胰岛素注射或泵治疗，存在血糖波动及并发症风险，胰岛移植也受供体和排斥问题限制，因此构建可靠动物模型、探究机制和开发新疗法十分迫切。
二、研究意义揭示发病机制：通过模型研究免疫细胞、细胞因子和信号通路作用，明确 T1DM 发病机制。
推动药物研发：用于评估候选药物疗效与安全性，筛选潜在药物并优化方案。
验证新疗法：验证细胞、基因和免疫调节等新型治疗策略的可行性与有效性。
辅助临床治疗：不同模型模拟 T1DM 不同亚型，为临床诊断和个性化治疗提供参考。
实验材料与方法
1、实验动物
展开剩余74%常用动物
NOD 小鼠：自发免疫模型，与人类 T1DM 相似，用于免疫机制和治疗研究。
STZ 诱导模型：通过注射 STZ 破坏 β 细胞建模，适用于药物筛选。
非人灵长类：生理与人类相似，用于临床前评价，但成本高、限制多。
饲养条件：SPF 级实验室，控制温湿度和光照，提供灭菌水和专用饲料，定期消毒。
2、主要试剂
模型诱导试剂：STZ 用于化学诱导，弗氏佐剂用于免疫诱导。
检测试剂：包括血糖、胰岛素、自身抗体检测试剂及病理染色试剂。
其他试剂：缓冲液、生理盐水等常用试剂。
三、实验步骤模型制备
STZ 诱导小鼠模型：禁食后注射 STZ，监测血糖和症状判定成模。
NOD 小鼠模型：饲养并监测血糖和症状判定成模。
实验分组：设模型、阳性药物、受试药物和正常对照组。
给药处理：选择合适途径给药，定期观察和检测。
样本采集：实验结束后取血和胰腺组织用于检测。
评价指标与结果分析
1、评价指标
一般状况：观察精神、饮食、体重等变化。
血糖指标：检测空腹血糖、观察血糖波动和进行糖耐量试验。
胰岛功能：检测胰岛素水平，观察 β 细胞数量和形态。
免疫指标：检测自身抗体和观察炎性细胞浸润。
2、结果分析
使用 SPSS 进行单因素方差分析，对比各组差异，验证模型和药物效果，结合多次实验确保数据可靠，用图表直观呈现结果。
隆科生物合作项目分子生物学实验：荧光定量PCR检测、Western blot检测、血常规、生化酶活、ELISA检测等。
细胞实验：耐药细胞株构建、细胞毒性实验、细胞迁移实验、细胞侵袭实验、细胞流式周期检测、细胞流式凋亡检测等。
动物实验：动物模型构建、动物饲养服务、动物临床前研究、药效评价、功能性评价等。
微生物学实验：抑菌试验、药敏试验、菌种鉴定、微生物多态性分析等实验。
病理检测：石蜡包埋、切片、HE染色、masson染色、番红固绿染色、天狼星红染色、免疫组化、免疫荧光单标/双标/多标、全景扫描、激光共聚焦拍照等。
发布于：山东省实配网配资提示：文章来自网络，不代表本站观点。
